A pesquisa mostra que os testes POC detectam apenas infecções de alto nível por WSSV – mas há uma solução melhor para os produtores de camarão
Em 2019, o CSIRO da Austrália realizou uma investigação científica sobre a eficácia dos kits de teste no local de tratamento do camarão na detecção do vírus da síndrome da mancha branca (WSSV). Na altura do estudo, os testes no local de atendimento tornaram-se um método de deteção de doenças para os agricultores, uma situação que persiste até hoje. Mas, com a recente apresentação das suas conclusões pela CSIRO no Simpósio ProAqua, é hora de uma reavaliação urgente das práticas de teste.
(Imagem acima: a autora, Dra. Melony Sellars, trabalhando no laboratório.)
O vírus da mancha branca exige controles de melhores práticas
O WSSV continua a persistir como um dos patógenos economicamente mais impactantes da indústria global do camarão. Em 2016, surtos graves de WSSV em Queensland, Austrália, colocaram o WSSV no centro das atenções da indústria nacional do camarão. Com a resposta de emergência ao WSSV destruindo as populações agrícolas e custando milhões de dólares aos produtores, os agricultores precisavam urgentemente de uma forma de monitorizar os seus animais quanto à infecção em fase inicial pelo WSSV.
A aceitação global de kits de teste POC, incluindo para WSSV, tornou-se uma segunda natureza na indústria do camarão, sendo utilizados para vários fins, incluindo a detecção de WSSV em fase inicial. Com a devastação do WSSV à sua porta em 2016, a indústria australiana solicitou acesso a esses kits, o que primeiro exigiu a aprovação do governo.
Em 2019, a pedido de uma indústria de camarão maltratado, o CSIRO iniciou uma avaliação laboratorial dos testes WSSV para determinar a eficácia e a adequação à finalidade dos kits de teste POC em comparação com os testes PCR laboratoriais.
CSIRO examina testes WSSV POC
A partir de 2019, a Organização de Pesquisa Científica e Industrial da Commonwealth (CSIRO) da Austrália colaborou com as partes interessadas da indústria do camarão em um estudo compreensivo de métodos de teste WSSV. O relatório do estudo – Avaliação de testes point of care (POC) para o vírus da síndrome da mancha branca (WSSV)) – compara testes comercialmente disponíveis projetados para detectar WSSV em fazendas comerciais de camarão com PCR WSSV executado em laboratório testes.
A pesquisa do CSIRO compara e avalia cinco testes de WSSV, compreendendo três testes rápidos de antígeno e dois testes baseados em PCR. Após testes exaustivos, o estudo mostra claramente que os kits de teste rápido de antígeno POC apresentam limites de detecção inferiores quando comparados com os testes laboratoriais de PCR. O grupo de pesquisa descobriu que os testes POC rápidos do tipo antígeno eram uma defesa abaixo do ideal contra o WSSV porque “os testes POC tinham menor sensibilidade do que os testes qPCR de WSSV de referência laboratorial validados”.
A falta de sensibilidade dos testes rápidos de antigénios POC é tal que cria, na verdade, uma falsa sensação de segurança para os agricultores. As conclusões do estudo CSIRO são de importância crucial para a indústria global porque a expectativa actual entre os agricultores é que os testes POC possam detectar o WSSV nas fases iniciais da infecção, fornecendo um alerta precoce da doença. No entanto, o estudo da CSIRO identifica problemas vitais com os kits de teste rápido de antigénios POC, o que significa que não são, de facto, uma solução para o alerta precoce e a prevenção do WSSV.
A falha perigosa revelada pelo estudo de testes POC da CSIRO
O estudo da CSIRO revela problemas substanciais com os kits de teste POC como forma de prevenir surtos de WSSV. Entre os problemas com os kits POC, o CSIRO enfatiza a lacuna entre as expectativas do usuário e a sensibilidade real do kit de teste em campo.
A confiança dos agricultores nos kits de teste POC é apoiada pela percepção de que podem detectar o WSSV suficientemente cedo para evitar perdas de stock em grande escala. No entanto, a investigação da CSIRO revela que os estudos utilizados para comprovar a capacidade do kit POC foram realizados em condições laboratoriais, onde a velocidade da infecção e as vias de transmissão não reflectiam a realidade nas explorações. Uma leitura cuidadosa das orientações dos fabricantes sobre alguns kits também revela que a validação ocorre em modelos sintéticos, fornecendo orientações irrealistas para uso no mundo real em amostras de camarão.
A equipa da CSIRO escreve no relatório que “na literatura existente, todos os testes POC foram relatados como sendo capazes de detectar o WSSV nas fases iniciais da infecção”. No entanto, continuam eles, “as experiências com camarões vivos conduzidas neste estudo demonstram que a doença da mancha branca progride muito mais rapidamente quando os camarões são injectados com WSSV em comparação com quando são coabitados com coortes infectadas por WSSV. Assim, o período de tempo previsto desde a exposição ao WSSV até à deteção do WSSV através de testes POC no terreno pode estar sobrestimado…”
(Imagem acima: camarões infectados com WSSV.)
Esta descoberta sublinha o problema crucial dos testes POC como meio de controlo do WSSV. O vírus se desenvolve mais rapidamente em camarões que são deliberadamente infectados para fins de validação do kit de teste POC. No entanto, quando utilizados em ambientes comerciais, onde a doença se desenvolve mais lentamente em animais individuais, os kits de teste POC não conseguem detectar o vírus suficientemente cedo para evitar que a infecção se espalhe pelas populações agrícolas. Esta falha fatal na sensibilidade do kit POC significa que se os agricultores continuarem a utilizá-los para a detecção do WSSV, não detectarão o vírus nas suas fases iniciais, levando a surtos contínuos da doença.
A proteção contra o WSSV requer uma mudança estratégica
O WSSV é agora endémico em todo o mundo, pelo que é essencial uma monitorização preventiva vigilante com tecnologia de testes adequada à finalidade. O WSSV pode destruir populações inteiras de explorações de camarão em poucos dias, sublinhando a necessidade de um regime de detecção precoce eficaz.
Uma das principais conclusões do estudo recente da CSIRO é que, quando se trata de testes fiáveis para WSSV, os actuais kits de teste POC não conseguem igualar a sensibilidade e a precisão dos testes PCR laboratoriais validados.
“Para todas as três cepas de WSSV avaliadas, os qPCRs de referência laboratorial foram 3 vezes mais sensíveis do que o teste POC mais sensível”, concluiu o estudo CSIRO. Na verdade, os testes PCR são 10 vezes mais sensíveis do que um dos kits de teste POC mais utilizados no mercado. A CSIRO afirma nas suas conclusões que para “para amostras positivas fracas” – típicas da infecção por WSSV em fase inicial – a sensibilidade dos testes POC é inadequada, “com apenas 100% – 56% das amostras positivas fracas replicadas com resultados positivos, em contraste com as 78 % de concordância demonstrada pelos qPCRs de referência laboratorial.”
(Imagem acima: testes laboratoriais de patógenos para WSSV são mais preciso e confiável do que os kits POC convencionais.)
Para os agricultores, a conclusão a tirar da investigação da CSIRO é enfaticamente clara: para evitar surtos destrutivos de WSSV, a indústria do camarão precisa urgentemente de se orientar para a utilização de testes PCR baseados em laboratório para testes de rotina em vez de depender de kits rápidos de antígeno POC. Notavelmente, esses testes PCR baseados em laboratório também devem ser devidamente validados pelo pessoal do laboratório, com todos os ensaios variando em desempenho com base no equipamento, na química, nas pessoas e nas condições operacionais.
Com tempos de resposta em testes laboratoriais tão curtos quanto vinte e quatro horas, qualquer preocupação com o imediatismo pode ser deixada de lado. A realização de um teste POC no local dá a falsa segurança de resultados rápidos, mas a realidade é que, devido à sua falta de sensibilidade, os testes POC não detectam a doença nas suas fases iniciais, quando um teste de laboratório a detectaria.
As conclusões da pesquisa para agricultores
O relatório da CSIRO mostra claramente que os testes PCR laboratoriais são mais sensíveis e fiáveis do que os kits POC atualmente omnipresentes. Deve-se também notar que tais testes PCR baseados em laboratório devem ser devidamente validados em qualquer laboratório para garantir um desempenho ideal e que a validação é um requisito contínuo e não um evento único.
O aspecto de alerta precoce dos testes PCR baseados em laboratório oferece uma vantagem vital aos agricultores, uma vez que saber sobre a infecção por WSSV na sua exploração com alguns dias de antecedência pode evitar perdas catastróficas de stock.
Quando os surtos de doenças podem dizimar as explorações de camarão em poucos dias, e milhões de dólares estão em jogo, a investigação da CSIRO envia um forte sinal à indústria do camarão para deixar de depender de kits POC. Testes PCR baseados em laboratório, com seu sensibilidade superior e fiabilidade, é a única forma de gerir eficazmente a ameaça do WSSV.
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Com a pesquisa da CSIRO mostrando claramente a inadequação dos kits de teste POC convencionais, Camarão MultiPath2.0 é a melhor solução para produtores que desejam proteção de ponta contra o WSSV.
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Sobre o autor
Dra. Melony Sellars tem 20 anos de experiência em Aquicultura, com profundo conhecimento em aquicultura de camarão. Ela tem ampla experiência na aplicação de novas soluções biotecnológicas para a indústria, genética e programas de melhoramento. Dr. Sellars é o CEO e Diretor Geral da Genética, fornecedora líder de tecnologia de gestão de patógenos e saúde de camarões.
